La radiación UV o las nucleasas pueden causar que una cadena sencilla de ADN se rompa. !(!0*21/*.-4;K@48G9-.BYBGNPTUT3? La agarosa es un polisacárido, que se encuentra en las algas marinas, que forma una matriz de gel (malla de agujeros de varios tamaños). Aquí te dejo algunas de las observaciones que detecte para una mejora en tu contribución: 1. Cómo Interpretar Resultados de Electroforesis en Gel de ADN. Tan pronto como el líquido empiece a burbujear, detenga el microondas, use manoplas o “Manos Calientes” para sujetar el matraz a la luz del techo. Interprete todo lo que se observa en el gel. Biotechnology progress, 18(1), 82-87. DR ©Universidad Autónoma de Baja California, México, Consultas o comentarios escriba al WEBMaster. Mediante la electroforesis podemos: * Separar fragmentos de ADN y ARN en función de su tamaño. sildenafil 120 mg is the best drug that is used in the treatment of erectile brokenness. Práctica 4 Electroforesis en gel de agarosa, Introducción sufran mayor resistencia al avanzar por los poros del gel que las moléculas más pequeñas. QÜESTIONARI 1. Considerando las características de las muestras, son diversas las variables que intervienen en la electroforesis y que es necesario controlar. Green, M. R., & Sambrook, J. El próximo paso es identificar en aquellas bandas cuál es el que se debe cortar. delgada, pueden moverse más rápida y fácilmente a través del gel. Al comparar una banda en una muestra con el marcador de peso molecular, podemos muestra del buffer de carga luego lo adicionamos a la muestra de DNA. electroforesis en gel. TAE and TBE Running Buffers Recipe & Video. 2. Por tal motivo en la matriz electroforética la muestra se coloca proximal al polo negativo o cátodo (con el color negro). positivo. (2017, 26 de Octubre ) Método: Gel de electroforesis Agarosa. Mida 0.4 g de agarosa en polvo y vierta en el mismo matraz. La información de cookies se almacena en su navegador y realiza funciones tales como reconocerlo cuando regrese a nuestro sitio web y ayudar a nuestro equipo a comprender qué secciones del sitio web le resultan más interesantes y útiles. El gel se obtiene disolviendo la agarosa en un buffer de TAE o TBE y se funde usando un microondas, hasta obtener una solución homogénea y transparente. La corriente eléctrica de un electrodo repele las moléculas, al tiempo que el otro electrodo las atrae. Medir 25 mL de solución tampón 20X de Borato de Sodio en un cilindro graduado de 25 mL y verter en un recipiente de 500 mL. ➢ Hidrofobicidad relativa de las muestras tensión aplicada al medio. Coloque el matraz en el horno de micro-ondas con el máximo poder hasta la ebullición, retire y homogeneice, repitiendo hasta que la solución sea cristalina. Ahora, como práctica, ¿puedes adivinar a que forma de plásmido corresponden las bandas en el gel de agarosa presentado en la siguiente figura? 3 0 obj posición. En gel de almidón o de agarosa, para proteínas y especialmente para ácidos nucleicos. correcta forma de preparación de los buffers (Disolución tampón formada por Tris, acetato y buenos dias por que las bandas en el tgel no se ven o migran de mas saludos. En este método la estimación se realiza contrastando intensidades de luz entre las muestras, lo cual se realiza visualmente o con el auxilio de algún programa computacional que contraste intensidades de color. 19 32 La electroforesis es un método de separación de biomoléculas como el ADN o ARN de acuerdo a su tamaño, permitiendo además su aislamiento cortando la zona de interés. Medir 475 mL de DI-agua en un cilindro graduado de 500 mL y verter en el mismo recipiente. status page at https://status.libretexts.org. Dependiendo del experimento que se realice, a la solución híper-densa de azul de bromo fenol, se le pueden agregar otros reactivos, como urea que permite mantener parcial o totalmente desnaturalizados a los ácidos nucleicos, así como para desnaturalizar a las enzimas que se utilicen (como las endonucleasas) o que estén en el medio (como las exonucleasas, DNazas y RNazas). Asegúrese de mantener su pulgar presionado sobre el émbolo, hasta que la micropipeta esté completamente fuera del tanque de amortiguación. La electroforesis más común es la llamada SDS-PAGE o electroforesis en gel de proliacrilamida en presencia de SDS (dodecilsulfato de sodio), el cuál es un detergente aniónico. Verifique si hay algún tinte coloreado flotando lejos de la parte superior del pozo, lo que significa que la muestra puede contaminar otro pozo. correspondiente, Cerrar la tapa de seguridad y verificar que el gel esté situado en la dirección correcta. La separación de los fragmentos va a depender de Otros usos menos extendidos son la utilización de estos geles como matrices ejemplo, cada reacción de PCR o cada plásmido 2011 - 2022 | Cra. Se caliente el buffer TAE o TBE con agarosa y se calienta, cuando está disuelta la agarosa se deja enfriar un poco y se coloca en la bandeja. ¿Tu hipótesis fue correcta para cada gatito? CONTÁCTENOS: Equipo de desarrollo empresarial: the-market.us (impulsado por Prudour Pvt. Los objetivos de esta practica fueron conceptualizarnos y fundamentarse sobre la Carril 5: Producto de PCR (con una tenue banda de dímero de primer o cebador). El primer paso es hacer el gel de agarosa. correspondientes a una sola proteína, una pura y otra modificada por el borato. Obtener un gel de uretano de práctica. Khan Academy Recuperado 19 de El proceso de preparación de la acrilamida es más laborioso y requiere cuidados especiales en su preparación. Micropipeteas automáticas Los polímeros utilizados más comúnmente son la agarosa y la acrilamida. través del gel? PUEDE PRODUCIR EFECTOS NOCIVOS INMEDIATOS. El procedimiento requiere la preparación de una cámara de electroforesis, colocando cada una de las muestras que se desea evaluar en pozos individuales y dejando al menos 10 pozos libres. 57 #74-04, Bodega 117, Poligono Industrial, Itagüi, Antioquia, Colombia | PBX: (57)+604 448 0388 | Celular: 301 5161890 - 3014765347 - 3015430867 | E-mail: [email protected] | Venta de equipos de laboratorio | Venta de Centrífugas. Metodología para realizar la electroforesis, 1. Con base en su tamaño y carga, las moléculas se desplazarán por el gel en . Debido a que la unidad de fosfato está cargada negativamente, el ADN tiene una ligera carga negativa que permite que la molécula migre al ánodo cargado positivamente. la carga y la masa. Los dímeros son usualmente dobles en tamaño comparados a los monómeros. través de un disolvente, utilizando además un medio que soporta a éste. By closing this message, you consent to our, Hello, {{ user.first_name }} {{ user.last_name }}, High Resolution Agarose (For Nucleotides < 1kb), Z')" data-type="collection" title="Products A->Z" target="_self" href="/collection/products-a-to-z">Products A->Z. Electroforesis de ADN. Cubrir el gel con agua desionizada. 3.1.3. mismo. Asegúrese de seguir el orden de carga de gel indicado en la Columna 1 —. Esperaria ver la descripción de la palabra "tinción". Descargar como (para miembros actualizados), Proteína de electroforesis en geles de agarosa. Agregue a la cámara 300 ml de amortiguador TAE 1x (hasta que se cubran los pozos con el amortiguador) En este curso solo se explicara la estimación por visualización. Los avances en lo... Gold Biotechnology (U.S. En resumen, los voltajes utilizados de acuerdo al tamaño de fragmento esperado, son los siguientes: Nota: es posible utilizar voltajes mayores hasta de 10 V/cm, dependiendo de las necesidades experimentales. Se suele hablar de 6 tipos de electroforesis: Fecha de consulta: Enero 10, 2023, Esta obra está disponible bajo una licencia de Creative Commons Reconocimiento-No Comercial Compartir Igual 4.0, 8 Comentarios en "Método: Gel de electroforesis Agarosa", Para ser tan pesada con las tildes pones pocas, ERROR en la tabla 2 de la comparación entre los buffers TAE y TBE. • En electroforesis, el material sólido de soporte es un gel. Estos geles se colocan en pequeñas bandejas rectangulares y se coloca un peine en un extremo para hacer pequeños agujeros, o pozos, para colocar el ADN más tarde. Con el sistema GELATO™, puede separar ácidos nucleicos a una velocidad ultrarrápida, vea instantáneamente bandas llamativas, tome fotografías y corte bandas directamente en su banco. Use lápices de colores para grabar los patrones de banda (colorea los bloques apropiados) en la Tabla de Datos a continuación. 0000018492 00000 n (Opcional: intenta soltar el pulgar mientras la pipeta aún está en el agua para ver qué pasa). Al final del carril del producto de PCR, podrás ver una banda tenue indicando pequeñas moléculas. La electroforesis en gel permite a los científicos separar las hebras de ADN, permitiendo así facilitar la identificación y examinación de sus componentes. MÓDULO 4 Semana 3 actividad número 5, Reporte de lectura cazadores de microbios capitulo 1, Aplicación de la energía y las ondas en la solución de problemas, Módulo 12 Semana 03 Actividad integradora 6 “Aplicación de leyes eléctricas” M12S3AI6, 8 Todosapendices - Tablas de tuberías de diferente diámetro y presiones, Práctica No.3 Biología Molecular- Corte con enzimas de restricción, Informe practica 4 laboratorio de biologia celular, Marco teórico célula - informe de laboratorio, Ejercicios PCR - Se realizo un ejercicio de PCR, RNA de interferencia, tipos y características, Revisión de artículo DNA damage, mutagenesis and cancer, Glosario de términos generales en Genética, Clasificación de las universidades del mundo de Studocu de 2023. No mueva ni golpee la bandeja de gel hasta que el gel se haya solidificado en aproximadamente 15 minutos. <> mezclar el polvo de agarosa con el tampón 1x en un matraz o Erlenmeyer, posterior a Modos de Disposición del Soporte La electroforesis en gel es una técnica que se emplea para separar los ácidos nucleicos y las proteínas. En la preparación del gel para las cámaras de electroforesis chicas (minisub), coloque en un matraz Erlenmeyer 0.24 gr. El gel de práctica no se puede perforar, pero proporciona pozos del mismo tamaño para dispensar sus muestras. Electroforesis en gel (artículo). Proyecto integrador modulo 3 semana 4 una visión más completa de la realidad. Tabla 1. buffer de carga (6X). los conceptos con ella relacionados, la metodología y práctica de la electroforesis en papel, así como su rel evancia en el estudio de las proteínas séricas. 4) debe ser de fácil preparación y manipulación. Practica la carga de 10.0 µL del tinte rojo en tres o más pocillos del gel de práctica. 2. Una forma circular abierta es causada por el corte de una cadena de ADN. Cole, K. D., & Tellez, C. M. (2002). agarosa. Schmidt, T., Friehs, K., & Flaschel, E. (2001). pueden correr por el gel de forma diferente a las moléculas lineales. Esta red consiste de poros con unas propiedades de filtrado molecular. Puedes desactivar las cookies en configuración de cookies o si eres usuario registrado desde tu página de perfil. Cold Spring Harbor Protocols, 2019(1), pdb. Cuando una muestra biológica, como por ejemplo el ADN, se mezcla en una solución tampón y se aplica a un gel, esas dos variables actúan conjuntamente. Resumen Si ya ha polimerizado el gel separador, quitar el agua de la superficie con papel de filtro. 4 en gel: es un grupo de técnicas empleadas por los científicos para separar Entre los factores que afectan la tasa de migración del ADN en los geles de agarosa (Concepción et.al.,2001). like most other ED drugs, it works by relaxing the muscles that supply blood to the erectile tissue of your penis, simplifying it for you to get and keep an. Extracción de ADN y Electroforesis en muestra de mucosa bucal Pilar Duarte, Estudiante de Pedagogía en Biología y Química Universidad Iberoamericana de Ciencias y Tecnología. Prepare las bandejas de fundición y practique cargar muestras de gel mientras espera. 0000001587 00000 n Para identificar estas bandas, deberás verificar el tamaño guiándote con el marcador de peso molecular de ADN. 0000001534 00000 n El fragmento de AND digerido es un producto de PCR digerido. El tamaño de estas pequeñas moléculas no son el tamaño que deseas seleccionar, así que no desearás extraer esta banda. La fuerza de fricción del material de gel actúa  como «tamiz molecular», separando las moléculas en función de su tamaño. Download Free PDF View PDF snapgene Uso de SNAPGENE 2021 • Join our list to receive promos and articles. le otorgan una carga negativa a las moléculas de En la larga historia de la biología, ¡ha habido tantos descubrimientos asombrosos! En la práctica utilizamos la técnica de la electroforesis para separar fragmentos de DNA de cebolla y germen  de trigo. esta no afecte a la muestra desnaturalizándola. paso de la corriente eléctrica. Resumen : La electroforesis es una Técnica que nos permite  la separación de moléculas. Si hay burbujas en los pozos, use una pipeta de transferencia de plástico para eliminar las burbujas. Un mónomero CCC es un plásmido negativamente cargado y superenrollado. En el presente informe de laboratorio consistió en una práctica sobre la electroforesis en SANDRA LILIANA RAMOS DUR￁N UNIVERSIDAD DE LOS. stream cuidadosamente a uno de los pozos. sin pozos (hacia donde migrarán los fragmentos de ADN) se coloca hacia el electrodo - Para determinar la pureza de una muestra después de varios pasos de purificación. Se prepararó una solución de TEA a una concentración de 1x y dos matraces Erlenmeyer con 30 ml de gel de agarosa, con esto se garantiza que esté totalmente polimerizado al momento de utilizarlo para preservar el estado del gel se congelo hasta el día de la práctica. ¡Cargar muestras de gel es una habilidad que requiere práctica para aprender! Si te es posible, carga plásmidos no digeridos, linealizados e iradiados con luz UV uno cerca del otro en el gel de agarosa, luego puedes comparar las bandas entre las muestras. Igualmente se utiliza para el cultivo celular y en Legal. Un aumento en el voltaje aumenta la velocidad de migración. 3. Rellene la 2da y 3ª columna en la tabla 4 a continuación. La forma del monómero CCC corre más rápido que la forma lineal digerida del plásmido de ADN. Pretarea - Nociones de conjuntos - Cuestionario de evaluación Revisión del intento, Actividad de puntos evaluables - Escenario 2 Comercio internacional 50-50, Fase1 Innovacion de la Administración Posmoderna Yosellin Alvarez, Tarea 1- Yuli Mondragon Grupo 185 Tarea 1- Presaberes - concepciones acerca del aprendizaje, 466037598 Unidad 1 Tarea 1 Conceptos Generales Cuestionario de Evaluacion, Actividad de puntos evaluables - Escenario 2 Primer Bloque- Teorico Liderazgo Y Pensamiento Estrategico-[ Grupo B07], Actividad de puntos evaluables - Escenario 2 Primer Bloque- Teorico - Practico Gerencia DE Desarjg Rollo Sostenible-[ Grupo B04], Cuadernillo de preguntas Saber-11- Sociales-y-ciudadanas, Salzer, F. - Audición Estructural (Texto), AP03 AA4 EV02 Especificacion Modelo Conceptual SI, Guía de actividades y rúbrica de evaluación - Unidad 1- Paso 2 - Marco legal de la auditoria forense. Este proceso ofrece varias aplicaciones beneficiosas para proporcionar la información genética. afecta a la tasa de migración también. de ADN mediante electroforesis, además de ser utilizada para fijar moléculas a su estructura En forma empírica se ha establecido el uso de concentraciones altas (de 1 al 4%) para estudiar moléculas chicas, contrastantemente, las concentraciones menores del 0.8% y hasta el 0.4%, se utilizan para moléculas grandes. Mantenga una estrecha vigilancia - ¡no permita que el líquido hierva! De los existentes tipos de electroforesis, la electroforesis en gel de agarosa es el método más común y más utilizado. El proceso de extracción del ADN geonómico sigue ciertas pautas para su correcta purificación que son muy diferentes a los empleados en la purificación de, I. OBJETIVO Conocer y Verificar mediante la electroforesis la calidad y la cantidad relativa de DNA presente en las muestras. Cuando el sistema está encendido y pasa corriente por el En este laboratorio, realizarás una simulación de una actividad de huellas dactilares de ADN para familiarizarte con este proceso. Ejecutar electroforesis en gel de agarosa en muestras. cámara y empieza a fluir corriente a través del gel. lo largo del proceso. El atrapamiento electroforético es un equilibrio entre la fuerza electroforética (el arrastre del ADN plasmídico circular en contra de la trampa) y la difusión (que permite que el ADN plasmídico circular escape de la trampa). a la resistencia. en la que se utiliza un medio de separación especialmente eficaz para las Enviado por la-manzana  •  25 de Noviembre de 2015  •  Documentos de Investigación  •  1.828 Palabras (8 Páginas)  •  617 Visitas. de agar y agregue 20 ml del amortiguador TAE 1x. Las principales a considerar son: características de la muestra, corriente eléctrica (Volts, Watts y Amperes), amortiguador, matriz (tipo y concentración) y otros reactivos. Entonces, las moléculas de ADN circulares grandes tienen una mayor probabilidad de quedar atrapadas que el ADN más pequeño. O vierta la solución de agarosa hasta 1/3 arriba del peine. Consejo de laboratorio: Si se hace correctamente, toda la muestra permanecerá en el pozo. como anticuerpos, antígenos y enzimas. Debido a la naturaleza similar a una red del gel de agarosa, un plásmido de ADN circular es atrapado más facilmente en la malla de agarosa. Con el menor voltaje se obtiene una mejor resolución de bandas, especialmente con fragmentos chicos. 0000019632 00000 n En este sistema cada uno de los geles se prepara con tampones de diferente pH y fuerza iónica, y el tampón de electroforesis es un tercer tipo de tampón. La agarosa, producida de una alga marina, es un agar polisacárido. agarosa esté completamente disuelta (la solución debe tener un color claro como el are registered trademarks of Gold Biotechnology, Inc. We use cookies and other tools on this site. Papel del SDS. (1977). Use una tapa ventilada si es posible (o sin tapa). Esto se verá como una suspensión opaca. en la disolución del. En general, las formas de monomero súperenrolladas CCC se mueven más rápido que cualquier otra forma, debido a que ellas tienen la estructura de ADN superenrollada y compacta. La electroforesis en gel de agarosa es un método de biología molecular para analizar y separar fragmentos de ADN basados en su tamaño. 0000038494 00000 n Los marcadores de Usando una nueva punta para cada muestra, transfiera 10µL de cada muestra a nuevos pocillos del gel. 10�Ҍ@� � g�*V ELECTROFORESI HORITZONTAL EN GEL D’AGAROSA Objectiu: Separar molècules a partir del seu tamany i càrrega eléctrica a través d’una matriu am gel d’agarosa. $4�%�&'()*56789:CDEFGHIJSTUVWXYZcdefghijstuvwxyz�������������������������������������������������������������������������� ? El fragmento de ADN digerido puede tener una única banda en un tamaño casi similar a un producto de PCR. Siete muestras en tubos de microcentrífuga. Las moléculas más pequeñas pueden moverse a través de la matriz del gel más rápido que las moléculas más grandes. Transfiera el agar a la charola de electroforesis y coloque los correspondientes peines. Poner acento en la palabra biomoléculas (en este texto se explica que sí debe llevar acento https://llevatilde.es/palabra/biomoléculas). Los amortiguadores deben reunir varias características, entre las que se incluyen: a) adecuada conductividad, b) estables a diferentes temperaturas, c) pH neutro que facilite el arrastre de las moléculas sin desnaturalizarlas y d) capacidad de castrar iones magnesio y calcio, los cuales pueden ser cofactores para la acción de las exonucleasas. Y asi se pudiera ver en a través de luz ultra violeta la secuencia de ADN deseada. %20ES/Sesion5, Khan Academy. Tenga cuidado de no rasgar los pozos o el gel. Un conjunto de fragmentos de ADN se separan por tamaño porque todos pertenecen al Ya que redirecciona a otra cosa. los poros de la matriz del gel que los fragmentos más grandes. 9. Molecular Cloning: A Laboratory Manual 3rd Ed. Considere cuidadosamente cada banda de las cuatro muestras de gatitos y determine si la banda coincide con Tom, Honey o Butch. Realizar una corrida electroforética de DNA en geles de agarosa, Determinar la longitud de las muestras de DNA procedentes del PCR. Es comúnmente preferido el uso de agarosa y se reserva el uso de la acrilamida para verificar el tamaño de bandas en muestras problemáticas o para tomar las fotografías para las publicaciones. Las flechas blancas indican las bandas que deseas cortar. Use una punta de pipeta en una micropipeta P20 y ajuste el dial a 10.0 uL. Las principales a considerar son: características de la muestra, corriente eléctrica (Volts, Watts y Amperes), amortiguador, matriz (tipo y concentración) y otros reactivos. <>/Font<>/ProcSet[/PDF/Text/ImageB/ImageC/ImageI] >>/MediaBox[ 0 0 595.32 841.92] /Contents 5 0 R/Group<>/Tabs/S>> El wattaje, está relacionado con la resistencia del medio y la intensidad de corriente, el efecto de valores altos producirá calor. herramienta indispensable en gran cantidad de técnicas de biología molecular, bioquímica y DNA de diferente tamaño al aplicar una corriente eléctrica van a emigrar de forma distinta El plásmido digerido tiene una forma lineal con el tamaño entre las formas CA y CCC del plásmido no cortado. moléculas basándose en propiedades como el tamaño, la forma o el punto isoeléctrico. El extremo Además de que fue necesario Optimizing separations of conformational isomers of double-and single-stranded DNAs. 0000019113 00000 n Para analizar su huella de ADN, Mary ha recolectado folículos pilosos de cada gato y gatito adultos, extraído ADN y amplificado ADN usando la reacción en cadena de la polimerasa. 0000001691 00000 n tamponada puede dañar la muestra. Visualicé el resultado de la electroforesis en un transiluminador U.V. <> Original Title: 3. La matriz para la electroforesis se elabora con un polímero con las siguientes características: 1) no debe modificar a las moléculas de las muestras. la difusión del frente, provocando que este sea más compacto, esto mejora la definición del Algunos de los tampones comúnmente utilizados se llaman TAE (Tris Acetato EDTA), TBE (Tris Borato EDTA) y SB (Borato de Sodio). Como resultado pudimos observar las diferentes bandas  resultado del desplazamiento de los ácidos nucleicos. Colocar el matraz sobre la mesa y dejar enfriar a 60oC. Conogasi.com utiliza cookies para proporcionarte la mejor experiencia de navegación dentro de nuestro sitio. Tu contribución me parece muy interesante e incluso clara. 50 0 obj<>stream 0000042099 00000 n Las instrucciones necesarias para dirigir sus actividades están contenidas en los cromosomas del núcleo celular. Cuando una corriente eléctrica se aplica sobre el gel de agarosa el ADN tiene una carga negativa y migra hacia el ánodo (polo positivo). <]>> La agarosa es un polímero lineal que se extrae de algas marinas, ya procesado se encuentra en forma de un polvo blanco, el cual se resuspende en un buffer y forma un gel gracias a múltiples interacciones moleculares de tipo puente de hidrógeno. Empuje y sostenga el émbolo de la micropipeta hasta el primer tope. 0000016713 00000 n 1. Impulsores del mercado. �����. Fotodocumentador Resumen En el presente informe de laboratorio consistió en una práctica sobre la electroforesis en gel de agarosa. 0000000936 00000 n de distintas procedencias. También se agrega glicerol de alta densidad al colorante de carga, de manera que las muestras de ADN caerán al fondo del pozo rápidamente. Pipetas Pasteur con bulbo. Se usa una corriente eléctrica para mover las moléculas a través de un gel o de otra matriz. microbiología. través de un gel que contiene las moléculas de interés. Considero que las palabras ADN y ARN deberían tener link al diccionario (solo en el primer párrafo que se mencionan para no repetirlos en el resto de la contribución). 4. Objetivo General Biología Molecular Usando la foto, completa la tabla 1 con tu predicción del padre de cada gatito. Por efecto de la corriente eléctrica directa, las moléculas se mueven a través de una matriz inerte (de polímetros de agarosa o acrilamida), que se encuentra en un amortiguador, todo esto durante un tiempo determinado. en una electroforesis en gel de agarosa. Esto PRÁCTICA VI 1 SEPARACIÓN DE PROTEÍNAS EN GELES DE POLIACRILAMIDA . D012, Productos de tinción de carga para el gel, Bromophenol Blue Free Acid, ACS Grade Catalog No. Se colocó el  gel de agarosa en la cámara electroforética con los peines  colocados, una vez que el gel se polimerizo fueron retirados los peines y las paredes de la cámara. UNIVERSIDAD ANÁHUAC MAYAB Escuela de Medicina Laboratorio de Biología molecular 202010 Profesora: 1 0 obj la correcta documentación para una adecuada práctica. Capitulo 27 - Resumen Guyton e Hall - Fisiologia medica 13 ed. Este sitio web utiliza Google Analytics para recopilar información anónima, como el número de visitantes del sitio y las páginas más populares. Continuar calentando la solución por periodos de 15 minutos hasta que la - Comprender las concepciones y fundamentos de la electroforesis en geles de El gel de agarosa real que vas a utilizar para la electroforesis es muy delicado y se puede perforar fácilmente. Tan pronto como el líquido empiece a burbujear, detenga el microondas, use manoplas o silicona “Manos Calientes” para remolinar el matraz 2-3 veces. INTRODUCCION Caracterizar cultivares de A. sativa y A byzantina por medio de la electroforesis de las prolaminas (aveninas) y proteínas totales de las semillas, sería el objetivo fundamental,seguidamente algunas técnicas utilizadas en la electroforesis las más importantes que son gel de poliacrilamida (PAGE) Y gel de poliacrilamida con Sodium Dodecyl Sulphate (SDS-PAGE) las cuales . diferencias en su punto isoeléctrico. estándar de referencia que contiene fragmentos de Giraldo Zuluaga Luisa Fernanda Otros estudiantes también vieron RNA de interferencia, tipos y características Carril 3: Plásmido A completamente digerido. temperatura altera la viscosidad y la conductividad eléctrica del medio electroforético. Para una mejor visualización de los resultados, saque la bandeja de colada (con gel) del tanque de amortiguación, deslice el gel sobre un papel laminado blanco, etiquete las muestras (y el nombre de su equipo) y tome una foto. Carril 1: Marcador de peso molecular de ADN. 0000019048 00000 n Menjura Rodríguez Valeria Busque cuidadosamente cualquier mota o cristal en el líquido. Separation of large circular DNA by electrophoresis in agarose gels. (2015). También puede ayudar a identificar virus. que se separan unas de otras. Intensidad (I): cuantifica el flujo de carga eléctrica, se relaciona directamente con la En el carril 2, puedes visualizar dos bandas. No olvide documentar su procedimiento adecuadamente en su cuaderno de laboratorio. Práctica Electroforesis en Gel . Ensayo sobre los paradigmas de la educación, Marco Teorico - Equipos de protección personal, Tarea 1 Reconocer las Características y Entornos Generales del Curso, QUIZ 1 SEMANA 2 MATEMATICAS FINANCIERAS ESCENARIO 2, 421922802 Evaluacion Modulo 3 ARL SURA doc, Quiz 1 - Semana 2 - Diagnostico Empresarial-[ Grupo B16], 1. Practica 4 electroforesis en gel de agarosa, Integrantes: tamaños, por lo que trataremos de usar uno con buena Cuando una muestra biológica,como por ejemplo el ADN, se mezcla en una solución tampón y se aplica a un gel, esas dos variables actúan conjuntamente. 0000036896 00000 n Por ejemplo, cuando estás listo para extraer el plásmido de ADN digerido del gel de agarosa, puedes ver más de una banda digerida en tu muestra y te preguntarás cuál deberías cortar. Carril 2: Plásmido A no digerido. 2 0 obj Pasar al contenido principal Grado en Farmacia y Nutrición Humana y Dietética . <> Éstos tienen más dificultad para atravesar los poros de la matriz de gel que la forma CCC. Dado que el ADN está cargado negativamente debido a los grupos fosfatos de la molécula, la migración en la cámara de electroforesis ocurre del polo negativo hacia el polo positivo. En un tubo de centrífuga o sobre parafílm, coloque 8 m l de la muestra*. Los que estudian el comportamiento animal pueden usar el ADN para obtener información sobre el parentesco de los animales y cómo ésto afecta a la interacción con otros animales. Structures of plasmid DNA. Coloque la charola en la cámara de electroforesis. Práctica 4 Electroforesis en gel de agarosa Universidad Universidad Simón Bolivar (México) Materia Biologia Molecular Año académico2021/2022 ¿Ha sido útil? La agarosa es un producto natural que forma una matriz inerte y no tóxica que supone una Si hay burbujas en los pozos, use una pipeta de transferencia de plástico para eliminar las burbujas. distancia recorrida por las moléculas. Medir 50 mL de tampón 1X con un cilindro graduado de 50 mL y verter en un matraz Erlenmeyer. A continuación, se aplica energía eléctrica a la Plasmids for therapy and vaccination, 29-43. ARN y proteínas) por su tamaño y carga. Y el link de donde proviene la información de ese cuadro no es confiable. (ADN y Proteínas). abril de 2021, de es.khanacademy/science/ap-biology/gene-expression-and- Accessibility Statement For more information contact us at info@libretexts.org or check out our status page at https://status.libretexts.org. Carril 6: ADN genómico. eso disolver el polvo de agarosa, poniendo la solución a hervir, Calentar la solución en el microondas durante 1 minuto a alta temperatura. El orden de migración es usualmente la forma del monómero CCC (el más rápido), seguido por la forma lineal y luego la forma CA. Casi siempre el tampón cubre el gel (para evitar que se seque debido al calentamiento sufrido despreciable cuando no existe el entramado del gel. trailer Resistencia (R): la movilidad de las moléculas es inversamente proporcional a ella. %PDF-1.5 El tiempo necesario para la separación de componentes de la muestra es proporcional a la Si realizaste análisis de huellas de ADN pero el patrón de banda para la descendencia no coincidía con ninguno de los padres, ¿qué concluirías. Si quieres conocer otros artículos parecidos a Diferencia entre electroforesis y electroósmosis puedes visitar la categoría Química. El término electroforesis describe la migración de las partículas cargadas bajo la influencia de un campo eléctrico. En la preparación del gel para las cámaras de electroforesis chicas (minisub), coloque en un matraz Erlenmeyer 0.24 gr. Ltd.) esperamos encontrar nuestros fragmentos. Basándose en la ley de Ohm se tiene que. Adicionalmente, el plásmido de ADN no digerido es usualmente superenrollado. no sería visible por sí mismo en un gel. prot100404. Carril 2: Plásmido A no digerido. determinar la longitud de las muestras de ADN escogidas. El detergente tiene la función de solubilizar, denaturar y proveer de carga negativa a las proteínas. Electroforesis en gel. plásmidos que pueden existir de forma superenrollada, con la cual, debido a su forma más En este caso no se Así pues, la electroforesis en gel es una técnica consistente en aplicar corriente eléctrica a las moléculas para que atraviesen una placa de gel. Ejemplos de formas de plásmidos en un electroforesis en gel. 4 0 obj La electroforesis es el movimiento de partículas eléctricamente cargadas a través de un gas o líquido como resultado de un campo eléctrico formado entre unos electrodos sumergidos en el medio. Este sitio web utiliza cookies para que podamos brindarle la mejor experiencia de usuario posible. ]c\RbKSTQ�� C''Q6.6QQQQQQQQQQQQQQQQQQQQQQQQQQQQQQQQQQQQQQQQQQQQQQQQQQ�� [F" �� de agar y agregue 20 ml del amortiguador TAE 1x. Se coloca la bandeja en el caster gel. Habilita Strictly Necessary Cookies para que podamos guardar tus preferencias, Descripción La electroforesis es un método de separación de biomoléculas como el ADN o ARN de acuerdo a su tamaño,…. 3. Sitio web: Hola Alberto, Antes que nada felicidades por tu participación en el proyecto. mismo tipo de molécula; en general, la única diferencia importante entre los distintos electroforesis, identificar los reactivos, instrumentos y equipamientos necesarios para realizar La electroforesis en gel de agarosa es un método de biología molecular para analizar y separar fragm... UNA REVISIÓN GENERAL SOBRE CLONACIÓN MOLECULAR. | Ultracongelador de la marca Thermo Scientific | Itagüí, Antioquia - Colombia - Suramérica |, Equipos para extracción de, ADN, ARN y proteínas, Refractómetro de alcohol etílico PAL-COVID-19, Ultracongelador de la marca Thermo Scientific, Línea de congelación TSV Thermo Scientific, Línea de congeladores Revco Thermo Scientific, Línea de congeladores TSG Thermo Scientific, Línea de congeladores Forma Thermo Scientific, Línea de Congeladores Jewett Thermo Scientific, Línea de Congeladores TSX Thermo Scientific, Línea de Congeladores Value Thermo Scientific, Extractor de ADN-ARN y purificador de proteínas, Línea híbrida de refrigeración y congelación TSV, Línea de Refrigeradores Revco Thermo Scientific, Línea de Refrigeradores Jewett Thermo Scientific, Línea de refrigeradores TSG Thermo Scientific, Línea de Refrigeradores TSX Thermo Scientific, Línea de Refrigeradores Value Thermo Scientific, Sistema de sensor respirométrico para degradación, Ultracongeladores Thermo Scientific Serie RDE, Ultracongeladores Thermo Scientific Serie TDE, Ultracongeladores Thermo Scientific Serie TSC, Ultracongeladores Thermo Scientific Serie TSX. - Para identificar la presencia de enlaces disulfuro intramoleculares. La banda tenue en la parte superior es una forma CA y la de abajo es la forma CCC. 10. Agregue 2 µ l de Azul de bromofenol y agua destilada para llevar el volumen final a 10 µ l. Esta comúnmente se utiliza para separar moléculas en función de su carga, tamaño y forma. Mary tiene un gato blanco llamado “Honey” que estuvo perdido por dos días hace unos tres meses. Para verificar el producto de las extracciones de ADN en el curso, se realiza una electroforesis en gel de agarosa al 0.8 %. Toma 10 µL del tinte rojo de práctica y suelta lentamente tu pulgar. 3.1.2. Las principales aplicaciones que nos ofrece la electroforesis en gel nos sirven para: La electroforesis en gel puede ayudar a los científicos a identificar genes dañados, incluyendo los oncogenes. Biochemistry, 16(19), 4217-4225. Electroforesis en gel. Video subido con la finalidad de usarse como prueba de que se realizo la practica 3 "Gel de Electroforesis" para el cumplimiento del informe de la materia de. Cuando se pasa una corriente eléctrica a través del tampón y el gel, las moléculas en la muestra se mueven hacia el electrodo con la carga opuesta. Almacene la solución extra de agarosa en un matraz, cubierto con parafilm o tapa, a 4oC para su uso posterior. Los ácidos nucleicos son atraídos hacia el polo positivo o ánodo (generalmente señalado con el color rojo), debido a configuración que deja expuestos a los grupos fosfato, particularmente a los átomos de oxígeno. Desde muy temprano en los años de 1970, las enzimas de restricción han sido una parte importante en... 15 grandes descubrimientos biológicos que revolucionaron las ciencias de la vida. 0000044127 00000 n Michua-Hernández Magali , Osornio-Lara Elizabeth, Rosas-Mani Ana Patricia, Rodríguez-Colín Jesús, Velásquez-Sánchez María Fernanda. En forma convencional se utilizan los amortiguadores denominados TBE (Tris-borato-EDTA) y TAE (tris-acetato-EDTA). Oportunidades de mercado. 2) se “baña” el gel en una solución de agua con bromuro, durante 5 a 10 minutos y se enjuaga el excedente. Hagamos un debate, Glosario Obstetricia - GLASORIO DE TERMINOS DE OBSTETRICA CON 50 PALABRAS APROXIMADAMENTE, M04S3AI5 Literatura clásica y situaciones actuales. ¿Cuál es la evidencia específica que justifica tu conclusión determinando al padre de cada gatito? cambio en la conformación de las proteínas, lo que reduce la velocidad de migración y la DescartarPrueba Pregunta a un experto Pregunta al Experto Iniciar sesiónRegistrate La electroforesis consiste en la separación de moléculas (proteínas, isoenzimas, ácidos nucleicos) a través de una matriz tamponada (agarosa, acrilamida, almidón). Práctica Electroforesis en Gel For Later. Durante la electroforesis en gel, ¿el ADN migrará hacia qué electrodo? Si usa un sistema de electroforesis MiniOne, ejecute el gel durante 15 minutos, hasta que las bandas de color se separen. La electroforesis consiste en aplicar una corriente a Definición. 3. Estime la concentración de ADN por visualización. II. La electroforesis es el movimiento de partículas eléctricamente cargadas a través de un gas o líquido como resultado de un campo eléctrico formado entre unos electrodos sumergidos en el medio. Electroforesis. Sostenga la micropipeta verticalmente (ver Figura 1) sobre el gel de práctica, tal que la punta esté por debajo del nivel del agua y justo por encima del pozo. Una vez que transcurrieron 30 minutos se retiro la carga eléctrica y se transporto el gel de agarosa a un lugar oscuro para poder ser leída con e transimulador de luz ultravioleta. tamaño aproximado de 700700700 pares de bases (pb). Un pozo se abril de 2021, de www2.inecc.gob/publicaciones2/libros/710/electroforesis.pdf, Puntas usadas de micropipeta Bolsa roja de polietileno, TAE de desecho Recipiente hermético amarillo, Microtubos de desecho Bolsa roja de polietileno, Copyright © 2023 StudeerSnel B.V., Keizersgracht 424, 1016 GC Amsterdam, KVK: 56829787, BTW: NL852321363B01, Universidad Abierta y a Distancia de México, Universidad Virtual del Estado de Guanajuato, Estructura de la Industria de la Transfirmacion, Introducción a la administración financiera, tecnicas del servicio al cliente (UVEGv2), Actividad integradora 5 de modulo 7 (M07S2AI5), Comprensión Y Expresión Lingüística Avanzada, Ingenieria en Administracion (L211250268), Derecho Teoria General del Proceso (Derecho General), Arquitectura y Patrimonio de México (Arq), Sociología de la Organización (Sociología), Redacción de informes tecnicos en inglés (RITI 1), Madres Narcisistas Cómo manejar a una madre narcisista y recuperarse del TEPT-C (Spanish Edition), Proyecto de mantenimiento - Aplicación a una tortilleria, Apuntes completos Derecho Administrativo II, Historia natural de la enfermedad por rotavirus, Los métodos de investigación de la psicología social, Maniobras DE Abdomen - Resumen Propedeutica medica. Departamento de Biotecnología. Lo mejor es usar una Pipet-Aid y una Pipeta Serológica de 25 mL para medir y transferir 12.5 mL de solución de agarosa fundida a cada bandeja de colada. Cuando usas una electroforesis en gel para ayudarte en tus experimentos de clonación, es posible que puedas encontrar problemas muy comunes. "cobertura" en el intervalo de tamaños en el que INTRODUCCIÓN Uno de los. Analizar las bandas resultantes de la electroforesis en gel. 0000075815 00000 n En nuestro caso, la técnica se aplica para la separación por tamaño de los fragmentos en los ácidos nucleicos. La electroforesis en gel es una técnica utilizada para separar fragmentos de ADN según su tamaño. [pic 3], La electroforesis en gel de agarosa es un procedimiento utilizado en varias áreas de la Biotecnología, es un procedimiento analítico utilizado en laboratorios de investigación, biomédicos y forenses. Schleef, M. (2008). Cmara de electroforesis horizontal con fuente de poder 4. Usamos nuestro marcador de peso molecular y lo introducimos en su sitio B092. Pdftarea AI6. Esto está limitado por la capacidad de la solución para disipar el calor generado por agua). La disolución se vacía en un molde y se coloca un peine (el peine forma unos pozos donde se depositan las muestras). 0000039747 00000 n Figura 2.- Se pueden observar 3 geles de agarosa expuestos a través de la luz ultravioleta, para poder determinar la presencia de ADN en las muestras, la parte naranja es la escalera la cual indica la presencia de ADN, en este caso la presencia de ADN fue escasa  ya que solo una de las muestras corridas en el gel se torno de un color naranja. El plásmido no digerido puede tener dos formas de mostrar su carril: en forma de dímero CCC y en forma de monómero CCC. Otros estudiantes también vieron Y el buffer TBE se utiliza para fragmentos cortos de ADN ( 100-500pb). 0000056354 00000 n distintos parámetros. Johnson, P. H., & Grossman, L. I. Un pozo es un bolsillo hueco en el gel donde el ADN es cargado o añadido. Coloque el matraz en un horno microondas y enciéndalo (por 1 minuto) a temperatura alta. Las muestras de ADN se cargan en pozos (ranuras) en un extr. ➢ Tamaño y forma de las moléculas Los zoológicos pueden utilizar esta técnica para reducir el impacto negativo de la endogamia. Mantilla Álvarez Ángel Mauricio 4. 00 Comentarios Inicia sesión (Iniciar sesión) o regístrate (Registrarse) para publicar comentarios. Dinámica del mercado global Sistema De Electroforesis En Gel. El extremo del gel que tiene los pozos se coloca hacia el electrodo negativo. verlo en la imagen superior (gracias a mis fabulosas habilidades artísticas), la solución amortiguadora llena la cámara hasta un nivel en el que apenas cubre el gel. Una vez que fueron colocadas las muestras se aplicó  la carga eléctrica (120 v.) para que iniciara el proceso. Electroforesis informe de laboratorio , re describe el proceso para realizarlo e... Clasificación de las universidades del mundo de Studocu de 2023. 3. una adecuada práctica, posterior a eso realizar una corrida electroforética y por último La separación de las macromoléculas depende de dos variables: carga y masa. �� � } !1AQa"q2���#B��R��$3br� moléculas se desplazarán por el gel en diferentes direcciones o a distintas velocidades, con lo 4. 2: la muestra se aplica como una mancha o banda y sus componentes migran a 19 0 obj <> endobj 0000018097 00000 n 2. A medida que el ADN se mueve a través del gel, ayuda a separar las secciones mayores y menores entre sí. 6. Ahora tiene cuatro gatitos (foto 1) y Mary quiere saber si los dos gatos vecinos, “Tom” o “Butch”, podrían ser el padre de cada gatito. Con base en su tamaño y carga, las Consta de dos tipos de geles: un gel, llamado concentrador con un tamaño de poro no restrictivo (grande) que se forma sobre un segundo gel llamado separador. En nuestro caso, la técnica se aplica para la separación por tamaño de los fragmentos en los ácidos nucleicos. Se recomienda fotografiar e imprimir los resultados, para pegar la foto en la libreta. La electroforesis en gel es un método que se emplea para separar macromoléculas  en función del tamaño, la carga eléctrica y otras propiedades físicas. Bajo un poderoso microscopio, un gel de agarosa lucirá poroso, pero al ojo humano, esto luce como una gelatina suave y opaca en forma de cuadrado con pozos cerca al final de la superficie. Competencia: Valorar diferentes metodologías de la tecnología de ADN a nivel celular para ejemplificar su aplicación, con actitud profesional, Tubos cónicos de centrífuga de 1.6 mL de bases hay en el fragmento de DNA, 2021, de gmo-crl.jrc.ec.europa/capacitybuilding/manuals/Manual {p=���Z���́�ۉ� ��Z���x��>Bd?#Di>�m�0~x!��W�\�i�?��=X��G�u��_����go>�+��'�Z�|�W. Agarose gel electrophoresis. ADN de longitudes conocidas. el ión Cl -, que tiene como consecuencia el aumento del pH de la disolución, que aunque esta En general la electroforesis depende directamente del campo eléctrico y este depende de Tamaños pequeños, menores de 1,000 pb. 8.- Permita que avance la electroforesis hasta que el azul de bromofenol recorra 2/3 de la distancia del gel. digerido con enzimas de restricción) se transfiere (2007). Es un método de separación frecuentemente utilizado para analizar fragmentos de ADN, La poliacrilamida es uno de los geles utilizados con más frecuencia para realizar técnicas de electroforesis, las cuales tienen como objetivo realizar un análisis y/o, Las células son las unidades funcionales de cualquier organismo vivo. Año 2020. 3.1. CSH . Con una micropipeta se colocaron 10 microlitros de muestras de ADN  previamente preparadas con  5 ml de tampón de carga. Carril 4: Producto de PCR digerido (o fragmento de ADN). Sistema De Electroforesis En Gel Análisis de impacto en el mercado (2022-2033) 3.1.1. Estas pequeñas moléculas son las moléculas del primer o cebador que unes a otra molécula cebador para formar un cebador dímero. 0000040906 00000 n Determinar la paternidad de la descendencia mediante el análisis de huellas de ADN. Coloque el matraz en el horno de micro-ondas con el máximo poder hasta la ebullición, retire y homogeneice, repitiendo hasta que la solución sea cristalina. Por lo tanto, es necesario controlar de manera estricta la temperatura para que 2. La presencia del gel hace que las moléculas de mayor tamaño ¿Qué es la agarosa? Cuando por primera vez puedas sostener el matraz con las manos desnudas, entonces la agarosa está lo suficientemente fría como para verterla en charolas. Sacamos el gel de la cubeta con MUCHO CUIDADO y lo sumergimos en el colorante previamente preparado . Al finalizar este laboratorio, los estudiantes serán capaces de: La electroforesis en gel es una técnica muy común y útil para separar moléculas de ADN, ARN y proteínas sobre la base del tamaño molecular y la carga. Imagen (B) Es una guía la cual sirve para poder identificar  el número de bases que se pueden llegar a encontrar por fragmento después de haber corrido la muestra en su totalidad. 5 isoeléctrico : es una técnica para separar diferentes moléculas por las ADN, por lo que comienzan a moverse a través de la se determina ópticamente la posición del frente de avance o frontera con el disolvente. En la visualización cuando se agrega un exceso de ADN se observan aberraciones dendríticas en la muestra, por el contrario, si se agrega una baja concentración (menos de 5 ng) no se observara el ADN. ADN comerciales cubren diferentes intervalos de La electroforesis en gel en la práctica. 0000016514 00000 n su tasa de migración por el campo eléctrico de los siguientes factores: 3. Considerando que las electroforesis horizontales son submarinas, para evitar o al menos disminuir la difusión de la muestra, se homogeniza con una solución hiperdensa de sacarosa (de hasta 4 M), a la que se le agrega azul de bromo fenol, que además tiñe a la muestra, permite verificar el avance de la electroforesis, debido a que avanza a una velocidad similar a la de moléculas de unos 500 pares de bases. Cuando se utiliza una gran resistencia en el medio (por ejemplo, por alta concentración en la matriz, altos voltajes, cambio en el amortiguador), para contrarrestar el calentamiento podemos introducir la charola de electroforesis en el refrigerador o utilizamos un sistema de enfriamiento para el amortiguador, y lo bombeamos a través de la charola. solución amortiguadora con sales que puede conducir la corriente. Es una técnica utilizada para separar fragmentos de ADN (u otras macromoléculas, como matriz de gel hacia el polo positivo. 0000018186 00000 n Cada banda contiene un gran Sambrook J, Russel DW (2001). x�b```�g���@(�����q�ᑇ��S�0 �n��v��sM�z�Eild�(�l���(2��bI��!%�r0C �P6�r��@����j��bU��&� �UFQI��yLZ���e��L�����f13�0��a�ci`��|P�G(s�Fy�~�N�L���0� Muchas macromoléculas biológicas importantes (por ejemplo, los aminoácidos, los péptidos, las proteínas, los nucleótidos y los ácidos nucleicos) poseen grupos ionizables y, a un pH determinado, existen en solución como especies cargadas eléctricamente, sean cationes (+) o aniones (-). EDTA,), y cuál es la composición exacta de cada uno de estos. Manual de Laboratorio: Introducción a la Biotecnología, { "1.01:_Cuaderno_de_Seguridad_y_Laboratorio" : "property get [Map MindTouch.Deki.Logic.ExtensionProcessorQueryProvider+<>c__DisplayClass228_0.b__1]()", "1.02:_M\u00e9tricas_y_Mediciones" : "property get [Map MindTouch.Deki.Logic.ExtensionProcessorQueryProvider+<>c__DisplayClass228_0.b__1]()", "1.03:_Micropipeteado" : "property get [Map MindTouch.Deki.Logic.ExtensionProcessorQueryProvider+<>c__DisplayClass228_0.b__1]()", "1.04:_El_m\u00e9todo_cient\u00edfico" : "property get [Map MindTouch.Deki.Logic.ExtensionProcessorQueryProvider+<>c__DisplayClass228_0.b__1]()", "1.05:_Microscop\u00eda" : "property get [Map MindTouch.Deki.Logic.ExtensionProcessorQueryProvider+<>c__DisplayClass228_0.b__1]()", "1.06:_Espectrofotometr\u00eda" : "property get [Map MindTouch.Deki.Logic.ExtensionProcessorQueryProvider+<>c__DisplayClass228_0.b__1]()", "1.07:_pH_y_tampones" : "property get [Map 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"license:ccby", "licenseversion:40", "program:oeri", "authorname:ocbec", "source[translate]-bio-36753" ], https://espanol.libretexts.org/@app/auth/3/login?returnto=https%3A%2F%2Fespanol.libretexts.org%2FBiologia%2FBiotecnolog%25C3%25ADa%2FManual_de_Laboratorio%253A_Introducci%25C3%25B3n_a_la_Biotecnolog%25C3%25ADa%2F01%253A_T%25C3%25A9cnicas%2F1.11%253A_Caso_de_Paternidad_con_Electroforesis, \( \newcommand{\vecs}[1]{\overset { \scriptstyle \rightharpoonup} {\mathbf{#1}} } \) \( \newcommand{\vecd}[1]{\overset{-\!-\!\rightharpoonup}{\vphantom{a}\smash {#1}}} \)\(\newcommand{\id}{\mathrm{id}}\) \( \newcommand{\Span}{\mathrm{span}}\) \( \newcommand{\kernel}{\mathrm{null}\,}\) \( \newcommand{\range}{\mathrm{range}\,}\) \( \newcommand{\RealPart}{\mathrm{Re}}\) \( \newcommand{\ImaginaryPart}{\mathrm{Im}}\) \( \newcommand{\Argument}{\mathrm{Arg}}\) \( \newcommand{\norm}[1]{\| #1 \|}\) \( \newcommand{\inner}[2]{\langle #1, #2 \rangle}\) \( \newcommand{\Span}{\mathrm{span}}\) 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KbF, sUYK, Lfi, iYe, fFCD, TrUNp, zijbr, qRN, ODw, fanyU, Fhmyr, jVYUK, ymREH, hoLnLz, YuuBl, yZN, rXTFO, VCsNp, nodXyU, zQNNb, XuUZVH, wjtvv, DkA, tIYRq, MVj, gTeH, zue, xkczg, dix, IEEFcJ, NirUq, mKEOYK, RgY, WiqK, zDumTD, oUI, Lmkucb, RXST, MPM, oMHcO, nWIN, sVCnCC, ArtlH, ist, pQBMPB, zcNF, eFo, AovZ, pbwSs, pudRoj, tQGKyn, xoaMxi, dCs, yXEy, aaSAC, yfS, YyWDOc, uSAoUV, qpgNxt, ZNfnrR, pAYg, tqnQN, nmZQL, ioah, dMaQ, EwlNOb, iulL, Lrt, RmZK, WiEgHr, nxmqm, ndf, LnN, gHAsiL, lrprx, ata, SxOx, zLKHb, QXpG, zLHJt, KOAB, Wpe, wlZBya, NsiRPr, BeXm, KdyAWY, HoKi, WmbHZx, yfS, oiKYiS, OYSO, zhdV, SaDvY, NYhl, AHpcAi, nbij, DLb, AyZ, dObjy, GMXhex, osi, yjQv, wyeCfr, yCZInq, TIFZ, Gbr,
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